2 细胞生长干预情况:第1天两组渗液都抑制细胞的生长;对照组第3天渗液仍然抑制细胞生长,而实验组却促进细胞生长;两组第7天的渗液都促进细胞的生长。见表2。
表2 不同时期创面渗液对皮肤成纤维细胞增殖的影响
实验组 |
对照组 |
空白组 |
|
第一天渗液 |
0.114±0.061* |
0.107±0.019* |
0.141±0.067 |
第三天渗液 |
0.225±0.011*# |
0.105±0.084* |
|
第七天渗液 |
0.246±0.033* |
0.213±0.035* |
注:与空白组相比,*表示P<0.05,与对照组比, #表示P<0.05。
讨论
成纤维细胞在伤口愈合的各个阶段都起着重要作用:在组织局部炎症反应阶段有助于伤口止血,在细胞增殖分化和肉芽组织生成阶段其增殖、迁移和活化有助于ECM中胶原的形成和毛细血管的再生,在组织塑型阶段成纤维细胞可以使伤口组织改构和重建。成纤维细胞的重要作用主要在于其分泌的MMPs、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和转化生长因子等一系列细胞因子。
本实验通过原代培养人皮肤成纤维细胞,绘制其生长曲线,并进行药物干预,通过MTT比色方法,检测不同时期渗液对其生长的影响。MTT比色方法的原理为:噻唑兰,简称MTT,可透过细胞膜进入细胞内,活细胞线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性MTT还原为难溶于水的蓝紫色的针状Formazan结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜(DMSO)溶解,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映细胞数量。本实验结果显示,对照组治疗后第1天的创面渗液抑制成纤维细胞的生长,第3天的创面渗液仍然抑制成纤维细胞生长,到第7天的渗液促进成纤维细胞的生长;而实验组第1天的创面渗液抑制成纤维细胞的生长,而第3天的渗液和第7天的渗液都促进成纤维细胞生长。Victor 等【3】发现,急性创面的渗液促进成纤维细胞的生长,而慢性创面的渗液会抑制成纤维细胞的生长。本研究中两组第1天的渗液都抑制成纤维细胞生长说明第1天创面经过清创后对创面渗液性质的改变不大,而实验组与空白组及对照组相比,第3天渗液明显促进成纤维细胞生长,说明此时在负压的作用下,渗液的性质发生了改变,出现了类似急性创面渗液的转变,显示波浪床结合封闭式负压引流治疗压力性溃疡能更快的改变创面渗液的活性以促进成纤维细胞增生、促进PU的愈合。
参考文献
[1] Courtney H. Pressure ulcer prevention and magagement. JAMA. 2003; 289: 223 – 226.
2 Exton-smith AN,Sherwin RW. The prevention of pressure sores. Significance of spontaneous bodily movements. Lancet, 1961,18(2):1124-6.
3 Stotts NA, Rodeheaver GT, Thomas DR. An instrument to measure healing in pressure ulcers: development and validation of the pressure ulcer scale for healing (PUSH). J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2001; 56(12):M795-799.
4 Victor E, Pricolo, Michael D. et al. Modulatory activities of wound fluid on fibroblast proliferation and collagen synthesis. Journal of surgical research 1990,48:534-538.
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